2004, Número 3-4
Microbiología 2004; 46 (3-4)
La irradiación con microondas para acortar el tiempo de procesamiento de muestras de bacterias flageladas para microscopía electrónica de barrido.
Hernández-Chavarría F
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Idioma: Ingles.
Referencias bibliográficas: 11
Paginas: 81-84
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RESUMEN
La irradiación con microondas (IMO) se ha aplicado en el desarrollo de métodos rápidos para procesar muestras biológicas para microscopía electrónica de barrido. En este artículo, proponemos dos técnicas rápidas y simples para procesar bacterias (Proteus mirabilis y Vibrio mimicus) para MEB usando IMO. En la metodología más simple, las bacterias se colocaron sobre un cubreobjetos, se secaron al aire y se sometieron a tinción conductiva. El reactivo empleado para la tinción conductiva fue el mordiente de un método de tinción para microscopía óptica (10 ml de una solución de ácido carbólico al 5%, 2 g de ácido tánico y 10 ml de una solución saturada de sulfato de aluminio en agua). En el segundo método, las muestras se fijaron dos veces (con glutaraldehído y luego con osmio), se sometieron a tinción conductiva, se deshidrataron por tratamiento en una serie de soluciones de etanol de concentración creciente, se trataron con hexametildisilazina (HMDS) y finalmente se secaron a 35°C por 5 minutos. En ambos métodos, los pasos desde fijación hasta tratamiento con HMDS se realizaron con IMO por 2 minutos en un baño de hielo, para disipar el calor generado por la IMO. Aunque ambas técnicas preservaron adecuadamente la morfología bacteriana, la última técnica llevó a una mejor conservación de la morfología bacteriana, incluyendo la apariencia de los flagelos. Una ventaja adicional es que el proceso puede completarse en menos de dos horas a temperaturas de IMO entre 4 y 5 °C. (Traducido por la Revista).REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)