Cabrera-Artiles Y, Veitia I, Barceló MT, Martínez D, Hernández I, Leal V, Armas R, Rubí JA

Idioma: Ingles.
Referencias bibliográficas: 0
Paginas: 1311-1317
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RESUMEN

El polipéptido multiepitópico TAB1, que representa regiones de la proteína gp120 del Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH), forma parte de los antígenos que componen el juego diagnóstico UMELISA® HIV 1+2 RECOMBINANT para la detección de anticuerpos anti-VIH. Este inmunodiagnóstico producido por el Centro de Inmunoensayo (CIE), es el que se utiliza en Cuba, tanto para la pesquisa de pacientes infectados con el VIH como para asegurar que toda la sangre que reciben los bancos esté libre del virus. Originalmente la proteína se expresaba en un vector bajo el promotor triptófano y su purificación se realizaba por HPLC de fase reversa, lo que encarecía el proceso y se obtenían bajos rendimientos. En este trabajo, con el empleo de nuevas técnicas de clonaje y purificación se realizó un rediseño del vector de expresión, que incluyó la modificación del gen para incorporarle una cola de histidinas a la proteína TAB1, lo que permitió purificarla por cromatografía de afinidad a iones metálicos inmovilizados. La modificación del sistema regulador del promotor triptófano por el ptrc ofreció un mejor control y niveles de expresión alrededor del 20 %. Con este nuevo proceso productivo se obtuvo una proteína TAB1-His con un grado de pureza y propiedades antigénicas que permiten utilizarla para la detección de anticuerpos anti-VIH y, por tanto, cumple con los requisitos exigidos para su empleo en el diagnosticador UMELISA® HIV 1+2 RECOMBINANT.