Rodríguez PCV, Martínez TG, Torres RB, Zúñiga RY, Alles GA, Martínez PA

Language: Spanish
References: 14
Page: 534-541
PDF size: 68.40 Kb.

ABSTRACT

Introduction: the Titanic antitoxin quantification is useful to assess the immune response against vaccinal antigens.
Objective: to develop a standardization and validation technique of the indirect ELISA to quantify titanic antitoxin in human serum.
Materials and Methods: the standard preparing to the assay curve was calibrated front the preparing Finlay Institute. The optimal indicators were normalized to each technique step developed.
Results: a good intra-assay precision was reach during validation in all cases. The coefficient of variation to parallelism was less than 10% and 110%. Detection limit was 0.002 UI/ ml. Analytic sensitivity reached was 0.01 UI/ ml.
Conclusions: the assay may be used to quantify Titanic antitoxin in human serum.

REFERENCES

1. Summary guide to tetanus prophylaxis in routine wound management. En: Heymann DL. Control of communicable diseases manual. 18ª ed. Washington, DC: American Public Health Association; 2004, p. 532.

2. Ochoa R, Martínez JC, Fajardo EM, Álvarez E, Estrada E, García AM, et al. Validación de un ELISA para la cuantificación de antitoxina tetánica en suero humano. VacciMonitor. 2000; 9(4):16-21.

3. Jauma A, Ínsua C, Macías C, González C, Bericiartu M. Respuesta inmune-celular y humoral en niños inmunodeprimidos vacunados con la vacuna cubana anti-hepatitis B. Revista Habanera de Ciencias Médicas. 2009; 8(2): 1-7.

4. Parslow T, Stites D, Terr A. Inmunología Básica y Clínica. 10ma ed. Ciudad México: El Manual Moderno; 2001.

5. Mena López L, Núñez Mesa C, Pérez Cabarco N, Fernández Estrada J, Muñoz Fernández R, López Molina L, et al. Valoración de la titulación de anticuerpos antitetánicos por UMELISA en donantes especiales. Rev Cubana Hematol. Inmunol Hemoter [revista en Internet]. Dic,2001;17(3):194-200. [Citado 2010 Nov 17]. Disponible en: http://www.scielo.sld.cu/.

6. Ochoa R. Sistema ELISA en ensayos clínicos de vacunas y estudios seroepidemiológicos. [Tesis en Opción al Grado de Doctor en Ciencias Médicas]. Ciudad de La Habana: Instituto Superior de Ciencias Médicas de La Habana, Instituto Finlay; 2001.

7. Ochoa R. Bases metodológicas para la evaluación de anticuerpos en ensayos clínicos de vacunas mediante técnicas inmunoenzimáticas. Segunda edición ampliada. Ciudad de La Habana: Finlay Ediciones; 2008.

8. Plikaytis BD, Carlone GM. Program ELISA for Windows User's Manual, version 2. Atlanta, GA, U.S.A.: Centers for Disease Control and Prevention; 2005.

9. Ochoa R, Martínez J, Ferriol X, Estrada E, García A, Blanco R. Guía para la Estandarización de técnicas inmunoenzimáticas en ensayos de vacunas. VacciMonitor. 2000;9(3):13-8.

10. Burd EM. Validation of laboratory-developed molecular assays for infectious diseases. Clin Microbiol Rev. 2010 Jul;23(3):550-76.

11. Nerey M, Ochoa R, Martínez JC, Licea T, Ferriol X, et al. Validación de un ELISA para la cuantificación de IgG anti-polisacárido capsular de Neisseria meningitidis serogrupo C. Biotecnología Aplicada. 1999; 16: 113-115.

12. Valderrama S, Pérez E, Aldama Y, Costa L, Quintana M, Pérez G, García G. Establecimiento y validación de un ensayo inmunoenzimático tipo ELISA, empleado en el control de la calidad del interferón alfa2b humano recombinante.Vaccimonitor.2009; 18(1): 8-13.

13. Centro para el Control Estatal de la Calidad de los Medicamentos (CECMED). Requisitos para la evaluación del desempeño de los diagnosticadores. Regulación No. 47. 2007.

14. Centro para el Control Estatal de la Calidad de los Medicamentos (CECMED). Validación de Métodos Analíticos. Regulación No. 41. 2007.